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（B1,B2，G1,G2）的高效液相色譜HPLC檢測方案
閱讀：450 發布時間：2021-8-16 
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是主要由黃曲霉 （aspergillus flavus）寄生曲霉 （a.parasiticus）產生的次生代謝產物，在濕熱地區食品和飼料中出現的機率。B1 、B2和G1、G2，就是經常經常出現在農產品中的的代表，毒性的排行“B1”，B表示藍色，因為它在紫外光的照射下會發出藍色熒光。除了親兄弟B2之外，它還有堂兄弟G1和G2，因為在紫外光下發射黃綠色熒光而得名。
在農產品中幾乎無法避免，不想餓死的人類也只好無奈地吃下一些。世界各國，都只能設定一個“*”。不超過那個標準，危害就小到可以忽略了。它們存在于土壤、動植物、各種堅果中，特別是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麥等糧油產品，當人攝入量大時，可發生急性中毒，出現急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續攝入，可造成慢性中毒，生長障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。AFT的致癌力也居，是目前已知致癌物之一。
由于在水溶液中會發生熒光淬滅，反相色譜中B1和G1兩種異構體熒光強度很弱，需要進行衍生化。衍生化的方法一般有柱前和柱后兩類，我國藥典在測定時采用碘柱后衍生法。
【樣品處理過程】
中藥：取供試品粉末15g（過二號篩），精密稱定，加入氯化鈉3g，置于均質瓶中，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速攪拌2min（攪拌速度大于11000r/min），離心5min（離心速度大于2500r/min），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45um）濾過，量取續濾液20ml，待凈化；
大米：取樣品25g，加入5g氯化鈉與125ml提取液（70%甲醇-水溶液）混勻，劇烈振蕩20min，用快速定性濾紙過濾，收集濾液；取10ml濾液加入20ml蒸餾水稀釋，過濾，收集濾液作為上樣液，取15ml該溶液待凈化；
植物油：取樣品25g，加入125ml提取液（80%乙腈-水溶液）混勻，劇烈振蕩20min，用快速定性濾紙過濾，收集濾液；取10ml濾液加入40ml蒸餾水稀釋，過濾，收集濾液作為上樣液，取25ml該溶液待凈化；
凈化過程需用到黃曲霉免疫親和柱，凈化過程略。
【色譜條件】
色譜柱：C18, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm
流動相:甲醇-乙腈-水=40:18:42
流動相B:將2.2g一水庚烷磺酸鈉與6.8g溶于500ml水中，與500ml甲醇混合，PH=3.5；兩相混合梯度脫洗；
波長：λex=360nm λem=450nm
流速：0.8 mL/min
衍生溶液為0.05%的碘溶液，衍生泵：0.3ml/min, 衍生溫度：70℃
